题目内容
【题目】（1）逆转录病毒转染法是目前将目的基因导人细胞的最有效的方法。山中伸弥于2006年把c-Myc等4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的皮肤成纤维细胞，诱导其变成多能干细胞——iPS细胞。在该技术中，逆转录病毒作为___________（基因工程的工具），它利用外壳蛋白与受体细胞表面的___________相互识别而感染皮肤成纤维细胞。若想提高转化效率，可利用___________技术改造病毒外壳蛋白。
（2）脂质体介导基因转移的效率很高，是植物转基因技术中常用的方法之一。脂质体是一种用卵磷脂等物 质制备的中空膜泡状结构的人工膜。传统的脂质体是将磷脂、胆固醇或其他脂类的乙醚溶液加入到DNA溶液中，经特殊处理得到单层或双层的带DNA的脂质体小泡，被受体细胞内吞而实现基因转移。
①脂质体能介导基因转移的原理是细胞膜具有一定的________，转移前植物受体细胞首先要_________。
②从理论上分析，脂质体对受体细胞___________（填“有”或“无”）选择性。
③若带有DNA的脂质体小泡导入动物体，能否使受体产生免疫反应？____________________。
（3）实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示，在细胞培养过程中要在细胞培养液中添加一定量的___________，以防止培养过程中的污染；丙过程中得到的细胞一般为___________（填“正常”或“不正常”）核型。
【答案】载体 受体蛋白质工程流动性去除细胞壁无不能抗生素正常
【解析】
基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。细胞工程能打破物种之间的界限，培育出作物新品种。动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础。第（3）小题图中，甲表示获取实验小鼠的组织细胞，乙表示用胰蛋白酶处理分散成单个皮肤细胞，丙表示原代培养，丁表示传代培养。
（1）基因工程中的目的基因自身不能复制，需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现其功能。常用的载体有质粒、噬菌体和病毒等。据题意可知，把c-Myc等4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的皮肤成纤维细胞，即在该技术中，逆转录病毒作为载体，它利用外壳蛋白与受体细胞表面的受体相互识别而感染皮肤成纤维细胞。要改造病毒外壳蛋白可用蛋白质工程技术，通过对基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质。
（2）①据题意可知，经特殊处理得到单层或双层的带DNA的脂质体小泡，被受体细胞内吞而实现基因转移，而吞作用的过程中实现了膜的融合，因此脂质体能介导基因转移的原理是细胞膜具有一定的流动性，由于细胞壁对植物细胞起到支持与保护作用，因此转移前植物受体细胞首先要去除细胞壁，以提高转移效率。
②脂质体是一种用卵磷脂等物质制备的中空膜泡状结构的人工膜，而人工膜具有选择性的基础是其上的蛋白质，而据题意可知脂质体中无蛋白质，因此脂质体对受体细胞无选择性。
③脂质体通过与受体细胞膜的融合实现基因转移，由于脂质体中无蛋白质，故无免疫原性，不能使受体产生免疫反应。
（3）使用培养液进行动物细胞培养时，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的抗生素。丙过程表示原代培养，形成的细胞株遗传物质没有发生改变，具有正常的二倍体核型。
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