题目内容
(12分)科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图,据图回答:
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(1)过程①表示采取 的方法来获取目的基因。
(2)形成图中②含有目的基因的DNA(重组质粒)需要的酶包括: 和 。
(3)基因工程中常用的载体除有质粒外,还有 。重组质粒包括启动子、 、 及终止子等部分。
(4)图中③过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,一般将受体大肠杆菌用 处理,使细胞成为 ,从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒,可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有 的培养基上,若细菌能够生长,说明:已导入了重组质粒或普通质粒A,理由: 。
(5)基因工程的第四步中,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质,用到的技术分别是 、 。
(1)反转录法 (2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶
(3)λ噬菌体的衍生物(动植物病毒) 目的基因 标记基因
(4)氯化钙 感受态细胞 (氨苄)青霉素 普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因
(5)DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
【解析】
试题分析:(1)由RNA来获得DNA用的是反转录法。
(2)运用的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
(3)常用的运载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物。重组质粒必须包含启动子,终止子,目的基因和标记基因。
(4)用氯化钙处理大肠杆菌细胞可以使其处于感受态状态。因本题上有2个标记基因,但抗四环素基因被插入的基因破坏掉了,因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因,如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长,说明已经导入了重组质粒或普通质粒A,因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因。
(5)目的基因检测在DNA水平上可用DNA分子杂交技术,是否翻译成蛋白质用抗原-抗体杂交技术。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的掌握及对信息提取分析运用能力。