ch1L基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因.为研究该基因对叶绿素合成的控制.需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞.技术路线如下图所示.对此描述错误的是 A．ch1L基因的编码区是连续不间断的 B．①②过程应使用同一种DNA限制性内切酶 C．①②过程都要使用DNA连接酶 D．若操作成功.可用含红霉素培养基筛选出该变异株题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。技术路线如下图所示，对此描述错误的是

A．ch1L基因的编码区是连续不间断的

B．①②过程应使用同一种DNA限制性内切酶

C．①②过程都要使用DNA连接酶

D．若操作成功，可用含红霉素培养基筛选出该变异株

练习册系列答案

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ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是，其作用是。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入可将变异株细胞筛选出来。

（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。
第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：
（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？        。
PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                  。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                      。
（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                       酶
对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的             键打开。
（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是        ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用           制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入             可将变异株细胞筛选出来。