题目内容
某同学想研究氨基酸的分离和鉴定的方法。已知实验室中有0.5%的赖氨酸,脯氨酸,缬氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。
现提供如下器材和试剂:
A.器材
1.层析缸 2.毛细管 3.喷雾器 4.层析滤纸 5.其他相关器材(如剪刀,铅笔,U形扣等)
B.试剂
1.扩展剂:4份水饱和的正丁醇和1份醋酸的混合物
2.显色剂:0.1%水和茚三酮溶液
若该同学想证明混合液确实含有上述5种氨基酸,请利用题给条件设计试验:
1)实验原理:
A.除脯氨酸,羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外,所用a-氨基酸和一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
B.在一定条件下,
。
2)实验步骤:
①取层析滤纸一张,剪成20厘米长,14厘米宽的滤纸条,在纸的一端距边缘2-3厘米处用铅笔画一条直线,再此直线上每间隔2厘米作一记号,共需作 处记号.
②
。
③将处理好的滤纸条卷成筒状用U形扣固定,放入加好了扩展剂的层析缸中,待扩展剂上升到一定阶段时取出滤纸,自然风干。本步骤的注意事项是:
。
④
.
3)请在下图中绘出滤纸条上的预期结果:(已知扩散速度为赖氨酸<脯氨酸<缬氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)
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1) 实验原理:不同氨基酸在扩展剂的溶解度不同,所以在滤纸上的扩散速度不同,从而出现在滤纸的不同位置上。
2)实验步骤:
① 6
② 用毛细管吸取氨基酸样品点在标记上 ,干燥后重复2-3次 。
③ 点样的一端在下,扩展剂的液面要低于点样线
④用喷雾器向滤纸上均匀喷上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,观察并记录层析斑点的位置.
3)略