题目内容
(7分)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此基因的变化进行检测。
（1）检测基因前要通过PCR进行DNA的扩增。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_____________________________________________________________________。
（2）下图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为___________________。
（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成______个片段；而患者的则被切割成长度为______对碱基和______对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因，P-表示异常基因。
(7分) (1) (5) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结
合到双链DNA片段的引物链上 (2)见下图
基因碱基对的替换（基因突变）
(3)3 460 220 (4)P+P-
解析
43.（10分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能破氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，促融获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中加入这两种细胞后，还要加入诱导剂，除融合的杂种细胞外，还有__________种融合细胞，细胞融合所依据的原理是__________。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理：
方法：在培养液中加入__________，培养后收集增殖细胞。
原理：培养液中加入该物质后，下列细胞中，不能生长的细胞有__________（写序号），不能生长的原因是__________，有的细胞能生长，原因是__________。
①骨髓瘤细胞 ②融合的淋巴细胞 ③杂种细胞 ④融合的骨髓瘤细胞 ⑤淋巴细胞
（3）培养分离出的杂种细胞，培养液中除了有糖、氨基酸、水、无机盐、微量元素、促生长因子外，还必须添加__________，同时还应控制好培养液的温度、__________（至少写两点）等外界环境条件。若出现细胞的接触抑制时，应用__________处理后分瓶培养。
（4）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如表（“+”有，“-”无），测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因的影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第__________号染色体上。
| 细胞株 | 人染色体编号 | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| A株 | + | + | + | + | - | - | - | - |
| B株 | + | + | - | - | + | + | - | - |
| C株 | + | - | + | - | + | - | + | - |
43.（10分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能破氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，促融获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中加入这两种细胞后，还要加入诱导剂，除融合的杂种细胞外，还有__________种融合细胞，细胞融合所依据的原理是__________。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理：
方法：在培养液中加入__________，培养后收集增殖细胞。
原理：培养液中加入该物质后，下列细胞中，不能生长的细胞有__________（写序号），不能生长的原因是__________，有的细胞能生长，原因是__________。
①骨髓瘤细胞 ②融合的淋巴细胞 ③杂种细胞 ④融合的骨髓瘤细胞 ⑤淋巴细胞
（3）培养分离出的杂种细胞，培养液中除了有糖、氨基酸、水、无机盐、微量元素、促生长因子外，还必须添加__________，同时还应控制好培养液的温度、__________（至少写两点）等外界环境条件。若出现细胞的接触抑制时，应用__________处理后分瓶培养。
（4）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如表（“+”有，“-”无），测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因的影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第__________号染色体上。
| 细胞株 | 人染色体编号 | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| A株 | + | + | + | + | - | - | - | - |
| B株 | + | + | - | - | + | + | - | - |
| C株 | + | - | + | - | + | - | + | - |