Question

1．(10分)(2012·福建普高毕业班质检)人外周血单核细胞能合成白介素2(IL－2)。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL－2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL－2生理功能、且不易降解的IL－2－HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答：

(1)培养人外周血单核细胞的适宜温度为________ ℃；图中②表示________过程。

(2)表达载体1中的位点________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。

(3)表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL－2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。

(4)应用________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。

Answer 1

答案：(1)37(或36.5±0.5)　反(或逆)转录

(2)a

(3)终止

(4)抗原—抗体

解析：(1)人体的体温是37 ℃左右，因此培养人体细胞的最适宜温度就是37 ℃。由mRNA到cDNA过程是逆转录过程。

(2)根据图解可知目的基因的两端分别是由限制酶EcoRⅠ、BglⅡ切割的，一般用同一限制酶切割才能形成相同的黏性末端，表达载体1中的位点a具有EcoRⅠ的识别位点，因此位点a应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。

(3)mRNA中如果含有终止密码子，则会导致翻译终止，不能合成出目的蛋白。

(4)抗原、抗体的结合具有特异性，抗原—抗体杂交技术可以迅速检测出酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。